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狐狸致病性大肠肝菌的分离与鉴定

阅读次数: 加入时间:2014-03-12

    随着黑龙江省养殖业结构的调整,经济动物养殖特别是狐貉养殖业已发展起来,逐渐成为黑龙江省养殖业的特色产业。但是由于气候、地理环境以及防疫措施不规范造成的经济动物的各种疾病时有发生。此外,近年来由于抗生素的滥用使得很多抗生素对病原菌的杀菌效果不尽如人意,一旦发病,不进行实验室诊断,病情很难控制,给养殖户造成了严重的经济损失。现将笔者遇到的狐狸致病性大肠杆菌病病原的分离与鉴定情况报道如下。
    参考资料:貉子大肠杆菌病的防治
    一、发病情况
    该狐狸养殖户位于黑龙江省阿城市郊区,共养殖100只狐狸,2006年9月上旬开始有狐狸发病,发病率超过50%,4天后开始有狐狸死亡,用药3天后仍不见效果,发病率逐渐升高,死亡率较低,发病病程长。
    二、临床症状和病理变化
    发病初期狐狸轻度腹泻,随着病程的发展,腹泻加剧,体温升高至40℃左右,食欲减退,精神萎靡,个别狐狸有干咳症状,喜卧;后期体温下降,四肢发软,全身脱水严重,耳鼻发凉,结膜苍白,排便减少,呼吸困难,鼻流黄色黏液,病程可长达2周以上。剖检2例病死狐狸,基本特征为肝脏明显肿大、质脆易烂、大面积充血;整个肺脏充血、郁血、出血,水肿明显,边缘增厚,切面流出淡红色、泡沫样液体;心内膜有出血点;脾脏变化不明显,肾脏呈轻微水肿;肠管内有多量黏稠液体,肠黏膜肿胀、充血,肠系膜淋巴结肿大、呈暗红色。
    三、实验室检查方法
    1、涂片镜检
    取剖检病变组织肺脏、肝脏和心血涂片,用革兰。和美蓝染色法染色,显微镜下观察细菌形态及染色特性。
    2、细菌分离
    无菌取病变组织肺脏、肝脏、心血分别接种于营养肉汤、血琼脂和麦康凯培养基上,用焦性没石子酸法37℃培养24小时,然后选择菌落进行纯培养。对纯培养物进行革兰染色,显微镜下观察细菌形态及染色特性。
    3、生化试验
    将分离到的菌株分别接种于生化发酵管,37℃观察1-5天。
    4、致病性试验
    取细菌纯化培养液,13000转/min离心1min,弃去上层液体,用等量无菌生理盐水收集菌体,并计数为1.72×10(10)mL,给12只18-24g小鼠(分成2组)腹腔注射,0.2mL/只;同时设对照小鼠2只,每只腹腔注射无菌生理盐水,0.2mL/只。观察发病情况、致死率及病理变化。

表1病原菌生化反应结果

    5、药敏试验
    将上述经过鉴定的分离菌分别采取常规药敏片法进行药敏试验。

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